> Dienoraštis > Laboratorinės eksploatacinės medžiagos

Kaip pasirinkti tinkamus ląstelių kultūros indus?

2024-11-29

Norint užtikrinti optimalų ląstelių augimą ir eksperimentinius rezultatus, labai svarbu pasirinkti tinkamą kultūrinę įrangą. Renkantis ląstelių kultūros indus, svarbu atsižvelgti į tokius veiksnius kaip ląstelių tipas, konkretus jūsų kultūros tikslas, kultūros mastas, auginimo terpės tipas, indų medžiaga ir dydis, paviršiaus apdorojimas, dangteliai dujų mainai ir jų suderinamumas su Jūsų laboratorine įranga.

Štai pagrindiniai veiksniai, į kuriuos reikia atsižvelgti renkantis tinkamą ląstelių kultūros indą

1. Pasirinkite ląstelių kultūros indą pagal ląstelių tipą

Prilipusios ląstelės

Šioms ląstelėms reikia paviršiaus, prie kurio galėtų prisitvirtinti ir išsiskleisti. Prilipusioms ląstelėms jums reikės indų, kurių paviršiaus plotas turėtų pakankamai vietos ląstelėms pritvirtinti ir augti.

Pavyzdžiai Audinių kultūra apdorotos kolbos, Petri lėkštelės ir kelių šulinėlių plokštelės.

Suspensijos ląstelės

Šios ląstelės auga plūduriuojančios terpėje, todėl į paviršių neatsižvelgiama.

PavyzdžiaiAudinių kultūros kolbos, verpimo kolbos arba bioreaktoriai didelės apimties suspensijos kultūroms.

2. Pasirinkite ląstelių kultūros indą pagal dydį (tūrio talpą)

Mažos kultūros

Mažo masto eksperimentams ar didelio našumo atrankai idealiai tinka mažesni indai.

Pavyzdžiai Kelių šulinėlių plokštelės (6, 24, 96 ląstelių kultūros plokštelės),Petri lėkštelės, arba T25 kolbos.

Didelio masto kultūros

Jei reikia auginti daug ląstelių, geriau naudoti didesnius indus arba bioreaktorius.

Pavyzdžiai T75 ir T175 ląstelių kultūrų kolbos, bioreaktoriai arba kolbos, skirtos suspensinėms ląstelių kultūroms.

3. Pasirinkite ląstelių kultūros indą pagal paviršiaus apdorojimą

Audinių kultūromis apdoroti paviršiai

Kraujagyslės yra iš anksto apdorotos, kad būtų skatinamas ląstelių prisirišimas, todėl jos yra tinkamos prilipusiems ląstelių tipams. Paprastai jie yra padengti tokiomis medžiagomis kaip kolagenas, fibronektinas ar kiti ekstraląstelinės matricos komponentai.

Neapdoroti paviršiai

Idealiai tinka suspensijos kultūroms arba kai ląstelėms nereikia prilipti prie paviršiaus. Paprastai jie naudojami ląstelėms, kurios laisvai auga terpėje.

4. Pasirinkite ląstelių kultūros indą pagal medžiagą

Polistirenas, dažniausiai naudojamas standartinėms ląstelių kultūroms. Jis skaidrus, leidžia lengvai apžiūrėti vizualiai ir puikiai tinka tiek prilipusioms, tiek suspensinėms ląstelėms.

Polikarbonatas arba polipropilenas naudojami tam tikroms bioreaktorių reikmėms ir indams, kuriems reikia daugiau lankstumo arba specifinio paviršiaus apdorojimo.

Stiklas, naudojamas standartinei audinių kultūrai dėl kainos ir dūžtumo, stikliniai indai gali būti tinkami specifiniams tikslams arba didelio masto kultūroms.

5. Pasirinkiteląstelių kultūros vartojimo reikmenysremiantis laivo konstrukcija

Kolbos

Bendrajai ląstelių kultūrai dažniausiai naudojamos T kolbos (T25, T75, T150). Plokščias paviršius yra gera vieta ląstelėms pritvirtinti ir augti. Jie gali būti naudojami ir prilipusioms ląstelėms, ir suspensijos kultūroms, jei palaikomos atitinkamos sąlygos.

Petri lėkštelės

Įprasta mažo masto kultūroms ir eksperimentams, kuriems reikia stebėjimo, pvz., kolonijų susidarymo tyrimams.

Kelių šulinių plokštės

Tai naudinga didelio našumo atrankai ir mažesnio masto eksperimentams. Lėkštės su 6, 12, 24, 48,96Yra 384 šulinėliai, kurie idealiai tinka ląstelių tyrimams, citokinų išsiskyrimui, vaistų tyrimams ir kitoms didelio našumo programoms.

Verpimo kolbos

Naudojamas suspensinėms ląstelių kultūroms, ypač didesniems tūriams, kai reikalingas kontroliuojamas maišymas, kad būtų palaikomas ląstelių augimas ir išvengta ląstelių susikaupimo.

Bioreaktoriai

Didelės apimties suspensijos kultūrai bioreaktoriai leidžia sudėtingiau valdyti aplinkos sąlygas (pvz., pH, temperatūrą, prisotinimą deguonimi) ir yra naudojami didelės apimties gamybai, pavyzdžiui, biofarmacinėje gamyboje.

6. Pasirinkite ląstelių kultūros indą pagal sterilumą ir ventiliaciją

Sterilumas

Įsitikinkite, kad indas yra sterilus arba buvo sterilizuotas, kad išvengtumėte užteršimo. Dauguma komercinių kultūrinių indų yra iš anksto sterilizuoti, tačiau visada patikrinkite pakuotę.

Vėdinimas

Kai kuriuose induose, pvz., kolbose, yra ventiliuojami dangteliai arba filtrai, leidžiantys keistis oru ir apsaugoti nuo užteršimo. Tai būtina auginant ląsteles didelio tankio sąlygomis.

7. Pasirinkite ląstelių kultūros indą pagal naudojimo patogumą

Autoklavuojamas prieš vienkartinį

Kai kurie kultivavimo indai gali būti pakartotinai naudojami autoklave (pvz., stikliniai buteliai, tam tikros plastikinės kolbos), o kiti yra vienkartiniai ir vienkartiniai (pvz., plastikinės Petri lėkštelės, kelių šulinėlių lėkštės).

Tvarkymas ir transportavimas

Apsvarstykite, kaip paprasta perkelti ląsteles tarp kraujagyslių. Pavyzdžiui, kelių šulinėlių plokštelėms gali prireikti specializuotų plokštelių, kad jas būtų lengva tvarkyti naudojant įrangą, pvz., automatines pipetes.

8. Pasirinkite ląstelių kultūros indą pagal auginimo terpės tūrį

Pasirinkite indą, kuriame būtų galima sutalpinti norimą auginimo terpės tūrį neeikvodami išteklių. Jei dirbate su didelio tūrio kultūra, gali prireikti didesnių kolbų arba bioreaktorių, o mažesni tūriai tinka ląstelių kultūros indams ar lėkštėms.

9. Pasirinkite ląstelių kultūros indą, atsižvelgdami į išlaidas

Vienkartinis vs daugkartinis

Vienkartiniai plastikiniai indai yra ekonomiški ir sumažina užteršimo riziką, tačiau jie gali būti brangūs atliekant didelio masto operacijas. Daugkartinio naudojimo stikliniai indai turi didesnę išankstinę kainą, tačiau juos galima sterilizuoti ir pakartotinai naudoti kelis kartus, todėl jie yra ekonomiškesni ilgalaikiam naudojimui.

Apimties efektyvumas

Įsitikinkite, kad indo dydis yra tinkamas, kad nebūtų švaistomos medžiagos, ypač naudojant brangias auginimo terpes ar reagentus.

10. Pasirinkite ląstelių kultūros indą pagal konkrečius taikymo reikalavimus

Vaizdavimas

Jei reikia vizualizuoti ląsteles mikroskopu, pasirinkite indus su optiškai skaidriomis medžiagomis ir atitinkamų matmenų vaizdavimo sąrankai (pvz., kelių šulinėlių plokšteles didelio turinio atrankai arba stiklinius indus gyvų ląstelių vaizdavimui).

Kontroliuojamas sujaudinimas

Suspensijos ląstelių kultūroms apsvarstykite verpimo kolbas arba bioreaktorius, kurie užtikrina kontroliuojamą maišymą, kad ląstelės būtų tolygiai suspenduotos.

Išvada

Norint pasirinkti tinkamą ląstelių kultūros indą, reikia suderinti kelis veiksnius, įskaitant ląstelių tipą, kultūros mastą, medžiagų suderinamumą ir konkrečius eksperimentinius poreikius. Prilipusioms ląstelėms reikės paviršių, skatinančių prisitvirtinimą, o suspensijos ląstelėms naudingas didesnis tūris ir maišymas. Mažo masto darbui gali pakakti kelių šulinėlių plokštelių arba T formos kolbų, o didesnėms kultūroms gali prireikti kolbų su suktuvu arba bioreaktorių. Visada įsitikinkite, kad indai atitinka jūsų sterilumo ir tvarkymo reikalavimus, ir atsižvelkite į ekonomiškumą, atsižvelgiant į jūsų naudojimą.

Atsižvelgdami į šiuos veiksnius, galite pasirinkti optimalų indą, kuris sudarytų tinkamas sąlygas jūsų ląstelių kultūrai ir eksperimentiniams tikslams.

Ankstesnis:Įvairių laboratorinių pipetės antgalių vadovas

Kitas:Cotaus pipetės antgaliai gaminami laikantis griežtos kokybės kontrolės