> Dienoraštis > Pramonės naujienos

Kodėl ląstelių kultūra pirmiausia lizuoja raudonuosius kraujo kūnelius?

2022-12-23

Pagrindinis įvadas
Eritrocitų lizatas yra vienas iš paprasčiausių ir lengviausių būdų pašalinti raudonuosius kraujo kūnelius, tai yra suskaidyti raudonuosius kraujo kūnelius lizatu, kuris nepažeidžia branduolinių ląstelių ir gali visiškai pašalinti raudonuosius kraujo kūnelius. Lizato skilimas yra švelnus raudonųjų kraujo kūnelių pašalinimo metodas, kuris daugiausia naudojamas audinių ląstelių, išsklaidytų fermentų virškinimu, atskyrimui ir gryninimui, limfocitų atskyrimui ir gryninimui bei raudonųjų kraujo kūnelių pašalinimui audinių baltymų ir nukleino eksperimentuose. rūgšties ekstrahavimas. Audinių ląstelėse, gautose iš raudonųjų kraujo kūnelių lizato, raudonųjų kraujo kūnelių nėra, jos gali būti toliau naudojamos pirminei kultūrai, ląstelių suliejimui, tėkmės citometrijai, nukleino rūgšties ir baltymų atskyrimui ir ekstrakcijai ir kt.

Naudojimo instrukcijos
Audinių ląstelių mėginys
1. Švieži audiniai buvo virškinami kasa/fermentu arba kolagenaze ir disperguojami į vienos ląstelės suspensiją, o supernatantas buvo išmestas centrifuguojant.

2. Paimkite ELS lizatą iš šaldytuvo 4 °C temperatūroje, įpilkite ELS lizato į ląstelių nuosėdas santykiu 1:3-5 (į 1 ml sutankintos ląstelės įpilkite 3-5 ml lizato), švelniai išpūskite ir išmaišykite.

3. Centrifuguokite 800–1000 aps./min. greičiu 5–8 minutes ir viršutinį raudoną skaidrų skystį išmeskite.

4. Nusodinta dalis surenkama ir centrifuguojama Hanko tirpalu arba be serumo kultūros tirpalu 2-3 kartus.

5, jei įtrūkimas nėra baigtas / pilnas, galima pakartoti 2 ir 3 veiksmus.

6. Ląstelių resuspendavimas tolesniems eksperimentams; Jei RNR ekstrahuojama, geriausia tai daryti tirpale, paruoštame pagal 4 veiksmą, naudojant DEPC vandenį

Raudonųjų kraujo kūnelių gyvavimo ciklas yra labai trumpas, tik 120 dienų, tačiau jie labai greitai dauginasi krauju, ir šiuo atveju yra ypač pajėgūs dalytis ląstelėmis, be to, yra greičiausiai besidalijančios ląstelės iš visų, todėl ši ląstelė yra labai vertinga. todėl tai labai naudinga ląstelių kultūrai. Tai labai paprasta, jame nėra jokių organelių, tik ląstelių membranos ir baltymai.

Ankstesnis:Kokios yra ELISA rinkinio funkcijos?

Kitas:Reikalavimai reagentams ir pagrindinis tirpalo koncentracijos vaizdas.